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Plasmid DNA 분리 예비레포트2025.04.261. 플라스미드 DNA 플라스미드는 생장에 필수적인 염색체이며 DNA에서 물리적으로 분리 돼 있는 대표적인 에피솜 DNA분자입니다. 플라스미드는 유전자 클로닝, 유전자 전달, 외래 유전자 또는 재조합 유전자 발현, 유용 단백질 생산, 백신 상산 등으로 활용될 수 있습니다. 플라스미드 DNA는 염색체 DNA와 달리 작은 환형 DNA이기 때문에 변성 후 회복이 상대적으로 빨리 이루어집니다. 이를 이용하여 플라스미드 DNA를 분리하고 정제할 수 있습니다. 2. 플라스미드 DNA 분리 원리 플라스미드 DNA 분리의 핵심 원리는 변성된 DN...2025.04.26
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플라스미드 DNA의 분리 및 정제 방법2025.01.041. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 세균 세포에서 분리할 수 있으며, 일반적인 total cell DNA 분리 방법과 유사하다. 세포를 배양하여 수확하고 세포 추출물을 만든 후, 단백질을 제거하고 에탄올 침전으로 DNA를 농축할 수 있다. 그러나 플라스미드 DNA 분리에는 세균 염색체 DNA와의 분리가 중요한 차이점이다. 플라스미드는 세균 염색체에 비해 크기가 작고 구조적 차이가 있어 이를 이용하여 분리할 수 있다. 2. 플라스미드 미니프레프 방법 플라스미드 DNA를 소량으로 분리하는 대표적인 방법으로는 알칼리 용해법,...2025.01.04
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전기 영동을 통한 DNA 분리 실험2025.05.011. 전기 영동 전기 영동은 물질을 분리하는 실험 방법의 한 종류로, 전기장을 걸어준 환경에서 물질들의 이동한 거리의 차이를 이용하여 물질을 구분하는 것이다. 전기 영동의 종류에는 Zone 전기 영동, 등전점 전기 영동, 겔 전기 영동 등이 있다. 겔 전기 영동은 전류를 흘려주어 전하를 띤 분자가 겔 내부에서 이동하여 분리되도록 하는 기법이다. 2. Agarose gel Agarose gel은 agarose 분자가 교차되어 있는 형태로, 3차원적인 그물 구조를 띤다. Agarose gel 내부에는 분자가 통과할 수 있는 구멍이 있어...2025.05.01
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Plasmid DNA 분리 결과 레포트2025.04.261. Plasmid DNA 분리 이 실험에서는 박테리아에서 Plasmid DNA를 분리하는 과정을 수행했습니다. 박테리아 배양액에서 박테리아를 추출하고, mini prep 방법을 통해 세포벽과 세포막을 부수어 Plasmid DNA만 분리했습니다. 그 후 1% Agarose Gel에 Sample Loading하고 전기영동을 통해 DNA 밴드를 확인했습니다. 하지만 실험 결과 DNA가 추출되지 않아 DNA Ladder와 비교할 수 없었습니다. 이는 실험 과정에서 약간의 차이로 인해 오차가 발생했거나 실험 진행이 미숙했기 때문으로 분석됩...2025.04.26
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플라스미드 DNA 분리 방법과 원리2025.12.161. 플라스미드 DNA 분리의 기본 원리 박테리아로부터 플라스미드 DNA를 분리하는 것은 유전공학의 필수 단계이다. 플라스미드 소량 분리법(plasmid mini preparation)은 한 번에 약 20-30 μg의 플라스미드를 분리하는 방법으로, 기본적으로 세 단계로 구성된다. 첫째, 박테리아 세포로부터 세포 용해액을 얻는 과정이고, 둘째, 플라스미드 DNA와 유전체 DNA의 크기 및 구조적 차이를 이용하여 플라스미드 DNA만 분리하는 과정이며, 셋째, 분리된 플라스미드 DNA를 농축시켜 순수한 용액으로 만드는 과정이다. 2. ...2025.12.16
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박테리아에서 DNA 분리2025.01.271. plasmid DNA 분리 실험 목적은 plasmid DNA 분리에 대해 이해하고, 그 과정 중 하나인 plasmid mini-preparation에 대해 알아보는 것이다. plasmid DNA 분리법의 공통적인 세 단계는 overnight culture, mini preparation, 순수한 plasmid DNA 분리 과정이다. mini-prep은 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법으로, 알칼리 조건에서 세포를 파괴시켜 DNA만을 분리하는 것이다. 2. plasmid DNA 분리 시약 실험에 사용된 시약은 LB 배지...2025.01.27
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플라스미드 DNA 분리 및 정제 실험2025.12.121. 플라스미드 DNA (Plasmid DNA) 플라스미드 DNA는 염색체 밖에 존재하는 원형의 DNA로, 박테리아 내에서 게놈 DNA와 별개로 복제되는 특징이 있다. 유전공학 실험에서 재조합 DNA 조작을 위한 벡터 DNA로 사용되며, 원하는 DNA 단편을 삽입하여 다양한 유전자 클로닝과 단백질 발현 등에 널리 활용된다. 본 실험에서는 대장균(E.coli DH5α)으로부터 플라스미드 DNA를 분리하고 정제하는 과정을 수행했다. 2. 알칼리 용해법 (Alkaline Lysis) 플라스미드 DNA를 분리하는 가장 보편적인 방법으로, ...2025.12.12
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박테리아에서의 DNA 분리2025.01.231. Plasmid DNA 분리 이 실험에서는 박테리아에서 Plasmid DNA를 분리하는 과정을 이해하는 것이 목적입니다. Plasmid DNA는 박테리아의 염색체 DNA와는 별도로 존재하는 작은 원형 DNA 분자입니다. Plasmid DNA 분리법을 사용하여 박테리아 DNA를 분리하는 단계별 과정을 수행하였습니다. 2. 박테리아 배양 실험 방법에 따르면 ampicillin이 포함된 LB 배지에 박테리아 colony 1개를 넣고 37°C에서 12~16시간 동안 배양하였습니다. 이를 통해 박테리아를 증식시켜 DNA 추출을 위한 충분...2025.01.23
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박테리아에서의 플라스미드 DNA 분리 실험2025.12.181. 플라스미드 DNA 분리 (Mini-prep) 플라스미드 DNA를 분리하는 과정을 prep이라 하며, 소량 분리 시 mini-prep이라 부른다. 가장 보편적인 방법은 Alkali lysis method로, 알칼리 조건에서 세포벽과 세포막을 파괴하여 DNA만 분리한다. 박테리아의 두 종류 DNA(chromosomal DNA와 plasmid DNA) 중 plasmid는 알칼리 조건에서 잘 변성되지 않는 특성을 이용한다. 세포벽을 깨는 Lysozyme과 EDTA 조건을 적용하면 세포가 터지고, 원심분리를 통해 상층액의 플라스미드만 ...2025.12.18
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EtBr-CsCl 밀도 구배를 이용한 플라스미드 DNA 분리2025.12.131. 플라스미드(Plasmid) 플라스미드는 세균 세포의 염색체와 별도로 스스로 복제할 수 있는 DNA 분자이다. 1 Kb에서 1 Mb의 다양한 크기로 존재하며, 형태에 따라 open-circular, relaxed circular, linear, supercoiled(closed-circular) 등으로 분류된다. 이 실험에서는 가장 뭉친 상태인 supercoiled 형태의 순수한 플라스미드 DNA를 분리하는 것을 목표로 한다. 2. 알칼리 용해법(Alkaline Lysis) 박테리아 세포로부터 플라스미드 DNA를 분리하는 가장 ...2025.12.13
