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면역학 SDS-PAGE 실험 레포트2025.01.031. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질 분리 기술로, 전기 영동 이동성을 이용한 기술입니다. SDS는 단백질에 결합하여 일시적으로 음전하를 띄게 하고, 분자량에 따라 각각의 단백질을 분리할 수 있습니다. SDS-PAGE는 stacking gel과 running gel로 구성되어 있으며, 이온들의 이동속도 차이로 인해 단백질들이 동일한 속도로 내려가게 됩니다. 이를 통해 단백질의 유무와 분자량을 확인할 수 있습니다. 2. Coomassie Blue Staining Coomassie Brilliant Blue G250은 단백질을...2025.01.03
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Protein electro-transfer and Western blot 실험보고서2025.01.161. Western blot Western blot은 찾고자 하는 protein의 antigen epitope와 반응하는 antibody를 이용하여 단백질 혼합물 중에서 원하는 단백질(antigen)을 찾아내는 방법이다. 전기 영동을 이용하여 단백질을 gel 상에서 크기에 따라 분리한 후, membrane에 transfer한다. Membrane에 발광하는 probe가 붙어 있는 antibody를 붙여주는 항원-항체 반응을 이용하여 찾고자 하는 특정 단백질을 검출한다. 2. Nitrocellulose membrane Nitrocell...2025.01.16
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MALDI-TOF를 이용한 펩타이드 질량분석 및 단백질 동정2025.12.181. MALDI-TOF 질량분석법 MALDI-TOF 질량분석법은 동일한 에너지로 가속된 펩타이드가 질량에 따라 다른 속도로 이동한다는 원리를 이용한다. 시료에 matrix를 섞어 레이저 에너지를 흡수하고 시료 분자를 기화시킨 후 이온화한다. Matrix는 레이저 에너지를 흡수해 시료에 전달하고 양성자를 제공해 이온화를 촉진한다. 이 방법은 펩타이드의 분자량을 정확하게 측정할 수 있어 단백질 동정에 효과적이다. 2. 펩타이드 질량 지문법 펩타이드 질량 지문법은 단백질을 특정 효소로 처리하여 펩타이드 혼합물을 만들고, 각 펩타이드의 질...2025.12.18
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[10점/A+] 연세대학교 공학생물학 및 실험I 3주차 단백질의 정량2025.05.041. 단백질 단백질은 생체 내 거대 분자들 중 하나로, 거의 모든 생명체의 역동적인 기능은 단백질에 의존한다. 단백질은 대부분의 세포에서 건조 질량의 50% 이상을 차지하며, 효소 단백질, 방어 단백질, 저장 단백질, 수송 단백질, 호르몬 단백질, 수용체 단백질, 수축 및 운동 단백질, 구조 단백질 등 다양한 기능을 수행한다. 2. Bradford 단백질 정량법 Bradford 단백질 정량법은 분광광도계를 이용하여 용액 속에 함유되어 있는 단백질의 양을 분석하는 방법이다. 이 방법은 쿠마시블루 G-250 (Coomassie Blue...2025.05.04
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Lowry-Folin 법을 이용한 단백질 정량2025.01.271. 단백질 정량 단백질 정량은 단백질의 발색반응과 흡광도 측정을 사용한다. 단백질은 농도에 비례하여 발색하기 때문에, 흡광도 측정으로 농도를 분석할 수 있다. Lowry-Folin 법은 Biuret 법에 추가 요소가 포함된 정량법으로, 강알칼리성 상태에서 2가 구리이온과 착염을 형성하여 발색하고 아미노산 중 트립토판, 타이로신, 시스테인이 Folin 시약을 환원시켜 청색으로 발색하는 반응을 이용한다. 2. BSA 표준용액 단백질 정량을 위해서는 정확한 농도를 알고 있는 BSA(bovine serum albumin) 표준용액을 사용...2025.01.27
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Lowry법을 이용한 단백질 정량 분석 실험2025.12.201. 단백질 정량 분석 방법 단백질 정량 분석은 시료 내 단백질의 양이나 농도를 구하는 과정으로 생화학실험의 기본이다. UV법, Lowry법, BCA법, Bradford법 등 다양한 방법이 있다. UV법은 280nm 자외선 흡수를 이용하며 빠르고 시료 회수가 가능하나 염과 핵산의 영향을 받는다. Lowry법은 구리이온의 환원 정도를 측정하며 5㎍/㎖의 낮은 농도까지 측정 가능하다. BCA법은 Lowry법을 개량한 방법으로 562nm에서 측정하며 정확도가 높다. Bradford법은 Coomassie Blue 염색약을 이용하며 반응이 ...2025.12.20
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Lowry protein assay(단백질 정량 분석) 예비레포트2025.01.221. 단백질 정량 분석 단백질 정량 분석은 시료 내 단백질의 양, 농도를 측정하기 위해 사용되는 방법으로 Lowry method, UV method, BCA method, Bradford method 등이 있다. Lowry method는 단백질의 펩타이드 결합이 알칼리성 조건에서 구리와 반응하는 Biuret 반응과 Folin-Ciocalteu 반응을 이용하는 방법이다. UV method는 단백질의 방향족 아미노산이 자외선을 흡수하는 특성을 이용하며, BCA method는 Lowry method의 Biuret 반응을 기반으로 한다. ...2025.01.22
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Lowry 방법을 이용한 단백질 정량 분석2025.12.201. Lowry Method 단백질 정량분석에 사용되는 화학적 방법으로, Lowry Reagent가 단백질의 티로신과 트립토판에 결합하여 청색을 띠는 원리를 이용한다. Folin & Ciocalteu's Phenol reagent를 추가로 사용하여 색 변화를 증진시키며, 이를 분광광도계로 측정하여 단백질 농도를 정량화한다. 2. UV/Vis Spectrophotometer 180~780nm 사이의 파장에서 시료 분자의 빛 흡수 정도를 측정하는 기기이다. 본 실험에서는 다양한 파장대(600, 650, 700, 750, 800nm)에서...2025.12.20
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Bradford 방법을 이용한 단백질 정량 실험2025.12.191. Bradford 정량법 Bradford 정량법은 산성 조건에서 Coomassie Brilliant Blue G-250 염료가 단백질의 염기성 및 방향족 곁사슬 아미노산과 결합하여 색상이 적색/갈색에서 청색으로 변화하는 원리를 이용한다. 595nm 파장에서 흡광도는 결합한 단백질의 농도와 비례하며, 2분 이내에 발색 반응이 일어나고 1시간 정도 안정성을 유지한다. 특별한 시약 첨가가 필요하고 계면활성제의 영향을 받기 쉬우며 단백질이 비가역적으로 변성되는 특징이 있다. 2. BSA(소혈청 알부민) BSA는 가장 풍부한 혈장단백질로...2025.12.19
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Lowry법에 의한 조단백질 정량 실험2025.12.201. Lowry법 Lowry법은 단백질 정량에 널리 사용되는 방법으로, 알칼리성에서 단백질의 펩타이드 결합과 구리가 반응하여 Cu+ 이온을 생성하는 Biuret 반응 원리를 이용한다. Cu+ 이온은 방향족 아미노산의 산화를 유도하여 포스포몰리브덴산을 푸른색의 헤테로폴리몰리브덴으로 환원시킨다. 이 방법은 0.01~1.0mg/ml 농도에서 측정 가능하며, 5μg/ml 정도의 단백질도 정량할 수 있는 매우 민감한 방법이다. Folin-Ciocalteau 시약을 사용하여 발색하며, 티로신과 트립토판 함량에 따라 색의 세기가 달라진다. 2....2025.12.20
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