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[서강대 일반화학실험2 A+ 레포트] 전기영동2025.05.141. DNA 구조와 특징 DNA는 Deoxyribonucleic Acid의 약자로, 핵산 중에서도 유전 정보를 저장한다. DNA의 단위체는 nucleotide인데, nucleotide는 인산, 5탄당, 염기가 하나씩 연결된 구조를 이룬다. DNA의 가장 큰 특징은 nucleotide가 줄줄이 결합해서 이중 나선구조를 띈다는 것이다. 이는 한 nucleotide의 인산과 다른 nucleotide의 deoxyribose가 결합하는 것 그리고 인산 및 nucleotide의 입체 구조 때문에 발생하는 현상이다. 2. 전기영동의 개념과 물질...2025.05.14
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[만점자료] DNA전기영동과 SDS-PAGE 실험 보고서2025.01.231. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 PCR을 통해 유전자를 증폭시킨 후, 전기를 이용해 DNA를 크기별로 분리하는 기술이다. PCR은 DNA 변성, Primer 부착, 신장 과정을 거치며 유전자를 지수적으로 증폭시킬 수 있다. 아가로오스 겔 전기영동은 한천을 이용해 만든 겔을 통해 DNA를 크기별로 분류할 수 있다. 실험 결과에서는 원래 플라스미드, 제한효소 처리 플라스미드, PCR 증폭 산물 등의 밴드를 확인할 수 있었다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 SDS를 이용해 단백질에 균일한 음전하를 부여하고, 폴리아크릴아마...2025.01.23
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SDS PAGE 실험보고서2025.05.041. SDS PAGE SDS PAGE란 Sodium Dodecyl Sulphate -Polyacrylamide Gel Electrophoresis의 줄임말로써, PAGE는 전기영동법을 지칭하는 말로서 사용되기도 하고, 때로는 겔 자체를 지칭하기도 한다. 이를 사용한 전기 영동법 역시 기본적 원리는 한천을 이용한 것과 같다. 허나 폴리아크릴아마이드 겔은 한천 겔에 비해 훨씬 촘촘한 다공성 물질이기 때문에 한천을 이용할 때에 비해 분자량이 작고 크기 차이가 작은 시료들을 분리할 때 이용한다. 따라서 또다른 고분자 물질이지만 핵산에 비해...2025.05.04
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전기영동을 이용한 단백질의 관찰(생화학실험)2025.01.161. 전기영동 전기영동은 전극 사이의 전기장 하에서 용액 속의 전하가 반대 전하의 전극을 향하여 이동하는 화학현상이다. 겔 전기영동법은 전기영동 현상을 단백질 분석에 응용한 초기 형태로, 단백질 크기에 따라 분리가 가능하다. 전기영동 실험에서는 SDS 처리를 통해 단백질의 전하를 균일하게 만들어 오직 크기에 따른 분리가 이루어지도록 한다. 또한 isoelectric focusing과 2D 전기영동법 등 다양한 전기영동 기법이 있다. 2. 겔 제조 겔은 acrylamide와 bisacrylamide를 혼합하여 중합 반응을 통해 만든다...2025.01.16
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플라스미드 정제 및 전기영동 분석 실험2025.11.171. 플라스미드 정제 (Plasmid Preparation) 세균의 유전체 DNA와 구별하여 플라스미드 DNA를 정제하는 실험이다. Mini-prep 방법을 사용하여 E.coli 배양액에서 플라스미드를 추출한다. 과정은 원심분리, 세포 현탁, 용해, 중화, 스핀 컬럼을 이용한 정제, 에탄올 세척, 용출 단계로 구성된다. 각 단계에서 특정 버퍼와 시약을 사용하여 플라스미드를 효율적으로 분리한다. 2. 겔 전기영동 (Gel Electrophoresis) 정제된 플라스미드 DNA를 분석하기 위해 0.8% agarose 겔을 사용한 전기영...2025.11.17
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단백질 정량 분석: BCA assay2025.01.021. 단백질 정량 분석 BCA assay는 단백질 정량 분석 방법 중 하나로, 단백질 시료에 BCA 시약을 가한 후 흡광도를 측정하여 단백질 농도를 구하는 방법이다. 이 방법은 단백질에 의해 환원된 구리 이온이 BCA와 반응하여 보라색 화합물을 형성하는 원리를 이용한다. 표준 단백질로 BSA를 사용하여 표준곡선을 그린 후, 미지의 단백질 시료의 흡광도를 대입하여 농도를 계산할 수 있다. BCA assay는 단백질의 아미노산 조성에 크게 영향을 받지 않아 비교적 정확한 정량이 가능하다는 장점이 있다. 1. 단백질 정량 분석 단백질 정...2025.01.02
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유전자 전기영동 실험 보고서2025.11.181. 전기영동(Electrophoresis) 전기영동은 전기장을 이용하여 분자 또는 입자들을 분리하고 구분하는 기술이다. 전기영동용기에 액체를 넣고 전극을 삽입하여 직류 전압을 인가하면 액 속의 입자는 대전되어 전극에 이끌려 이동한다. 물질의 대전 극성에 따라 음극을 향하는 cataphoresis와 양극을 향하는 anaphoresis로 구분된다. DNA, RNA, 단백질 등의 분자 분리 및 크기 추정, 염기 서열 결정, 핵산 및 단백질의 구조 연구 등 다양한 분야에서 활용된다. 2. 아가로스 겔(Agarose Gel) 아가로스 겔은...2025.11.18
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제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동법과 PCR에 의한 DNA 분리 및 확인2025.01.071. PCR PCR의 기본 원리는 DNA를 단일가닥으로 열변성시킨 후 올리고뉴클레오티드를 결합시키고 DNA 중합효소로 DNA를 합성하는 과정을 반복하여 DNA를 증폭하는 것입니다. PCR에 필요한 주요 요소로는 주형 DNA, 시발체, dNTPs, Taq 중합효소, MgCl2 등이 있으며, 이들의 농도와 반응 조건을 최적화하는 것이 중요합니다. PCR 산물은 전기영동으로 확인할 수 있습니다. 2. 전기영동 전기영동은 DNA 분자의 크기와 전하에 따라 이동 속도가 달라지는 원리를 이용하여 DNA 단편을 분리하는 기술입니다. 아가로스 겔...2025.01.07
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형질 전환 실험: 원핵 세포의 유전자 조작2025.11.141. 형질 전환(Transformation) 형질 전환은 외부에서 만들어진 plasmid를 plasmid가 없는 원핵 세포에 삽입하여 새로운 유전형질을 나타내게 하는 과정입니다. 제한효소를 이용하여 plasmid의 특정 부위를 절단하고 원하는 염기서열을 삽입합니다. Competent cell을 CaCl₂로 처리하여 외부 DNA를 쉽게 받아들일 수 있는 상태로 만들고, 42°C heat-shock과 ice bucket 처리를 통해 plasmid를 세포 내로 도입합니다. 이 과정은 인슐린 생산 등 의약품 개발에 광범위하게 활용됩니다. ...2025.11.14
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Agarose gel 만들기 및 DNA electrophoresis 레포트2025.05.041. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 중합 효소 연쇄반응이라 불린다. 캐리 멀리스에 의하여 1985년에 개발된 중합 효소 연쇄반응(PCR)은 현재 유전물질을 조작하여 실험하는 거의 모든 과정에 사용하고 있는 검사법이다. PCR은 DNA의 원하는 부분을 복제 및 증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 이 기술은 사람의 게놈과 같이 매우 복잡하고 양이 적은 DNA 용액에서 연구자가 원하는 특정 DNA 단편만을 선택적으로 증폭시킬 수 있다. Tm은 프라이머 용융 온도라고 한다. 모든 프라이머는 거의 동일한 온도...2025.05.04
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