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생화학 5단원 단백질의 정제 요약정리2025.04.301. 단백질 정제의 중요성 세포 내에서 일어나는 많은 활동들은 단백질에 의해 수행된다. 따라서 단백질이 생체 내에서 어떤 기능을 하는지 아는 것은 생명활동을 이해하는데 매우 중요하다. 단백질의 아미노산 서열은 단백질의 3차 구조를 결정하고, 이 구조가 상호작용하여 4차 구조를 만든다. 즉 폴리펩타이드의 서열이 전체 구조를 결정하고, 단백질의 고유한 구조는 단백질의 기능을 결정한다. 따라서 이들 간의 관계는 매우 중요하다. 단백질의 구조를 알고, 서열을 구하고 그 기능을 알기 위해서는 반드시 순수한 단백질이 필요하다. 따라서 단백질의...2025.04.30
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재결정화를 통한 정제 방법 결과2025.11.131. 재결정화(Recrystallization) 재결정화는 불순물을 제거하고 순수한 화합물을 얻기 위한 고전적인 정제 방법입니다. 이 방법은 용질의 온도에 따른 용해도 차이를 이용하여 뜨거운 용매에 고체를 녹인 후 냉각하면서 순수한 결정을 석출시키는 원리로 작동합니다. 재결정화는 유기화학 실험실에서 가장 널리 사용되는 정제 기법 중 하나이며, 적절한 용매 선택이 성공의 핵심입니다. 2. 정제 방법(Purification Method) 화학 물질의 정제는 불순물을 제거하여 순도 높은 화합물을 얻는 과정입니다. 재결정화 외에도 크로마토...2025.11.13
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증류를 이용한 정제 방법2025.11.131. 증류(Distillation) 증류는 액체 혼합물을 끓는점의 차이를 이용하여 분리하고 정제하는 물리적 분리 방법입니다. 가열을 통해 혼합물을 기화시킨 후 냉각하여 액화시키는 과정으로, 순수한 액체 성분을 얻을 수 있습니다. 화학 실험실에서 가장 기본적이고 널리 사용되는 정제 기술 중 하나입니다. 2. 정제 방법(Purification Methods) 정제는 혼합물에서 원하는 물질을 순수한 상태로 분리하는 과정입니다. 증류 외에도 재결정, 추출, 크로마토그래피 등 다양한 방법이 있으며, 각 방법은 물질의 성질과 혼합물의 구성에 ...2025.11.13
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SDS-PAGE를 이용한 단백질의 분석2025.01.231. SDS-PAGE SDS-PAGE는 SDS가 단백질에 일정 간격으로 결합하여 charge density를 일정하게 하고, 단백질을 변형시켜 모든 단백질이 일정 모양(선형)을 갖게 함으로써 단백질이 전기장에서 크기(분자량)에만 의존적으로 분리되게 한다. Stacking gel과 Resolving gel의 pH 차이로 인해 단백질이 크기별로 분리된다. Coomassie blue 염색을 통해 단백질 band를 확인할 수 있다. 2. 단백질 정제 실험 결과, sample2에서 Naa30 protein의 사이즈에 해당하는 protein ...2025.01.23
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[생물공정실험] 3주차 Gene expression analysis by RT-PCR 예비보고서2025.04.261. cDNA 정의 및 합성 방법 cDNA(complementary DNA)는 RNA를 주형으로 역전사효소와 DNA 중합효소에 의해 합성된 DNA입니다. 역전사효소를 이용한 cDNA 합성에서는 RNA와 annealing 위치에 따라 3종류의 primer를 사용할 수 있습니다. (1) 역전사 효소 (reverse transcriptase; RTase), (2) RT반응에 사용하는 primer (oligo dT primer, random primer, gene-specific primer). 2. Downstream applicatio...2025.04.26
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추위 노출에 따른 백색지방의 베이지화와 갈색지방 활성화 연구2025.11.181. qPCR을 이용한 유전자 발현 측정 qPCR(실시간 정량적 중합효소연쇄반응)은 RNA를 역전사효소로 cDNA로 변환한 후 실시간으로 증폭하는 기법입니다. 본 실험에서는 추위 노출 마우스와 일반 환경 마우스의 지방조직에서 Ucp1, Dio2, Tbp 유전자의 mRNA 발현량을 비교 측정했습니다. RT-PCR 단계에서 total RNA와 oligo dT, dNTP를 반응시킨 후 역전사효소, DTT와 혼합하여 cDNA를 생성하고, 이를 qPCR로 40 사이클 증폭하여 유전자 발현 수준을 정량화했습니다. 2. 백색지방의 베이지화와 갈...2025.11.18
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탄수화물의 역할과 건강한 섭취2025.11.151. 탄수화물의 기본 개념 및 역할 탄수화물은 우리 몸에 필수적인 영양소로 에너지의 주요원으로 작용한다. 당과 전분으로 구성되어 있으며, 우리 몸에서는 이들을 소화하여 포도당으로 분해하여 에너지로 사용한다. 탄수화물은 우리 몸의 기본 에너지원이며, 운동이나 뇌 활동 등 일상적인 활동에서 필요한 에너지를 생산한다. 또한 우리 몸의 대사를 촉진시켜 주며, 단백질과 지방의 대사에도 영향을 미치는 중요한 역할을 한다. 2. 탄수화물의 종류 탄수화물은 단순 탄수화물과 복합 탄수화물로 나뉜다. 복합 탄수화물은 혈당 조절에 도움을 주는 섬유질을...2025.11.15
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[약학실습 A+] 단백질 분리 정제 결과레포트2025.01.181. 단백질 분리 정제 본 실험에서는 Size Exclusion Chromatography 기법을 이용하여 BSA와 Lysozyme으로 구성된 단백질 혼합 샘플을 분리 정제하였다. FPLC 장비를 사용하여 분리된 단백질 분획을 수집하고, UV spectroscopy를 통해 각 분획의 농도를 측정하여 수득률을 계산하였다. 실험 결과, BSA의 수득률은 24%, Lysozyme의 수득률은 16.16%로 나타났다. 이는 일반적으로 기대되는 90% 이상의 수득률에 크게 미치지 못하는 수준으로, 시간이 지나면서 단백질 구조가 분해되었기 때문...2025.01.18
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[화학공학실험 A+] 액체-액체 추출 실험 결과보고서2025.01.121. 액체-액체 추출 액체 혼합액 중 원하는 성분을 그 혼합액에 섞이지 않는 용매에 용해시켜 분리하는 액체-액체 추출 실험을 수행하여 산업현장에서 빈번히 사용하는 분리-정제의 실제 경험을 익힌다. 여기서는 액체 혼합물(증류수+에탄올 30%)의 원액에 용매(클로로포름)를 작용시켜 액체 혼합물 중에 있는 특정 물질(에탄올)을 분리한다. 2. 분리 및 정제 분리란 혼합물을 순물질로 나누는 작업으로 혼합물에서 순물질을 추출하는 조작을 말한다. 정제란 물질의 순도를 높이는 작업이다. 3. 액체-액체 추출의 이론적 배경 액체-액체 추출은 액체...2025.01.12
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생명과학실험1 SDS-PAGE & Coomassie blue Staining2025.01.131. SDS의 역할 및 원리 SDS(sodium dodecyl sulfate)는 계면활성제의 일종으로 단백질이나 핵산의 구조를 깨뜨려 선형으로 만들어주는 역할을 한다. 아미노산의 소수성 부분과 hydrophobic interaction을 하며 결합하는데, 아미노산 2개당 1개 정도 binding하여 단백질을 변성한다. 2. Gel에 들어가는 시료의 역할 ① Tris-HCl: Stacking gel과 Resolving gel의 pH를 다르게 하여 각 gel에서 Glycine의 charge 다르게 조정해준다. 또한 Cl-를 첨가해주어서...2025.01.13
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