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생물공정실험 예비보고서_Mammalian Suspension Cell Culture2025.01.041. 세포 배양 이 보고서는 동물 세포 배양에 대한 기술을 다루고 있습니다. 주요 내용은 세포 계대 배양, 부착형 세포 배양, 부유형 세포 배양, 세포 성장 패턴, CHO 세포주 등입니다. 세포 배양 기술은 치료용 단백질 생산 등 다양한 생물공정에 활용되는 핵심 기술입니다. 2. 세포 계수 및 생존율 측정 보고서에서는 혈구계수기와 트리판 블루 염색을 이용한 세포 계수 및 생존율 측정 방법을 설명하고 있습니다. 이를 통해 배양 중인 세포의 건강 상태를 확인하고 최적의 배양 조건을 찾을 수 있습니다. 3. CRISPR-Cas9 유전자 ...2025.01.04
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[일반생물학실험]원핵세포 배양 및 관찰2025.01.231. 원핵세포 배양 및 관찰 이번 실험은 사람의 손에 묻은 다양한 종류의 균을 관찰하기 위해 고체 배지에 접종하고 배양하여 세균들을 키운 다음, 음성균과 양성균이 얼마나 도포되어 있는지 모르기 때문에 음성과 양성을 구별하지 않는 단일염색법을 통해 세균의 형태를 관찰하였다. 그리고 증식한 세균 콜로니 하나를 액체 배지에 넣어 배양하고 다시 고체 배지에 도말하여 배양하면 어떤 모습을 띠는지 실험하였다. 1. 원핵세포 배양 및 관찰 원핵세포는 진핵세포와 달리 세포핵이 없는 단순한 구조를 가지고 있습니다. 이러한 원핵세포를 배양하고 관찰하...2025.01.23
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[생물공정실험] 1주차 Mammalian suspension cell culture 결과보고서2025.04.261. EGFP 유전자 발현 조절 이번 실험에서는 CRISPR-CAS9을 이용해 EGFP 유전자 발현을 조절하는 방법을 사용했다. EGFP 유전자를 발현시키려면 promoter 유전자가 존재해야 하고, 발현시키지 않으려면 promoter 유전자를 제거해야 한다. 2. CHO-S 세포 배양 이번 실험에서는 CHO-S 세포를 사용했다. CHO-S 세포는 부유하면서 자랄 수 있어 배양 속도와 공간 활용도가 adherent 세포에 비해 좋아 생산성이 높으므로 산업적으로 잘 쓰인다. 또한 인간과 진화적으로 가까워 human-like PTM, ...2025.04.26
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포유세포의 동결보존2025.01.021. 포유세포 동결보존 포유세포를 장기간 배양하면 오염이나 유전적 변이로 인해 세포가 소실되거나 변화할 수 있다. 따라서 세포를 동결보존하여 안정적으로 유지하고 보관하는 것이 중요하다. 동결보존 과정에서는 동결보호제를 사용하여 얼음 결정 형성을 억제하고 세포 손상을 방지한다. 대표적인 동결보호제로는 DMSO, glycerol, ethylene glycol 등이 있으며, 이들은 세포막을 투과할 수 있는 특성을 가지고 있다. 동결 및 해동 속도 또한 세포 생존에 중요한 요인이므로 주의해야 한다. 1. 포유세포 동결보존 포유세포 동결보존...2025.01.02
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세포 계대배양 실험2025.01.021. 세포 계대배양 세포 배양 시 한정된 공간에서 세포 증식이 제한되므로, 계대배양을 통해 새로운 공간을 제공하여 세포가 지속적으로 분열할 수 있도록 한다. 또한 실험에 사용되는 세포의 일관성을 보장하기 위해 유전적 특성이 동일한 세포주를 지속적으로 대를 이어 배양한다. 계대배양 시 세포를 분리하는 방법으로는 enzymatic dissociation과 physical dissociation이 있으며, 세포의 특성을 고려하여 적절한 방법을 선택해야 한다. 2. Trypsin의 작용 원리 Trypsin은 단백질 분해효소로, 세포가 다른...2025.01.02
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[A+ 리포트] Subculture (세포생물학실험)2025.04.251. 세포 배양 세포 배양 실험을 위해 clean bench 내부를 소독하고 실험 재료를 준비합니다. 배양액을 37°C로 유지하고, 세포 상태를 현미경으로 확인합니다. 배양액을 제거하고 PBS로 세척한 후 트립신을 처리하여 세포를 분리합니다. 분리된 세포를 원심분리하여 세포 펠릿을 수집하고, 새로운 배양액에 재현탁하여 새로운 배양접시에 분주합니다. 2. 현미경 관찰 세포 배양 접시를 현미경 위에 올려놓고 세포의 상태를 관찰합니다. 세포 밀도가 70-80% 정도인지 확인합니다. 3. 트립신 처리 트립신-EDTA 용액을 세포 배양 접시...2025.04.25
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[A+ 리포트] 세포생물학실험 - 세포배양배지의 종류와 특성, DMSO의 세포 독성, 70 EtOH 사용 이유2025.04.251. 세포배양배지의 종류와 특성 세포의 배양을 위해선 세포가 생장할 수 있는 특정한 환경의 조성이 필요하다. Growth media라고도 불리는 세포배양배지는 액체 혹은 고체 상태로써 세포가 생장하는데 필요한 여러 종류의 아미노산, 무기염류, 비타민, 생장인자, 완충제 등이 포함되며 특히 미생물 배지와는 가장 큰 차이점이라고 할 수 있는 5~20%의 혈청(serum)이 추가되는 등의 각종 성분들이 포함되어 있다. 일반적으로 사용되는 세포배양배지의 종류로는 BME, MEM, DMEM, RPMI 1640 등이 있으며 각각의 특성이 다르...2025.04.25
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[A+ 리포트] 6well plate를 이용한 Cell counting and seeding에 관한 실험 프로토콜2025.04.251. 세포 배양 실험 프로토콜에 따르면 세포 배양을 위해 clean bench, 37°C water bath, CO2 incubator 등의 장비를 사용하며, HeLa 세포주를 이용하여 실험을 진행합니다. 세포 배양 시 배지 온도, 세포 밀도, 오염 여부 등을 확인하는 것이 중요합니다. 2. 세포 계수 및 분주 실험에서는 trypsinization을 통해 세포를 분리하고, hemocytometer와 trypan blue 염색을 이용하여 세포 수를 계수합니다. 이후 계수된 세포를 6well plate에 적정 농도로 분주하는 과정을 거...2025.04.25
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인천대학교 나노바이오실험(2) A+ 자료) 5. Hemocytometer를 이용한 세포 수 산정2025.01.051. Hemocytometer를 이용한 세포 수 산정 이번 실험에서는 hemocytometer를 이용하여 세포 부유액에 있는 세포의 수를 현미경으로 측정하여 단위 세포수를 계산해보았다. Hemocytometer는 혈액 속의 혈구의 개수를 정확하게 계산하기 위해 만들어진 도구로, 사각형 모양의 슬라이드와 유리 뚜껑으로 구성되어 있다. Cell counting은 현미경을 통해 보았을 때 1 mm2인 정사각형의 격자무늬 안에 있는 세포의 수를 계산하고 4개를 평균치 내어 평균치 X를 도출하였다. 이후 희석배수를 포함한 2104을 곱하여 ...2025.01.05
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E. coli와 Yeast의 Cell Culture2025.05.061. Prokaryote Prokaryote는 핵막이 없는 원핵생물을 의미하며, 단세포생물일 경우가 많고 주로 무성 생식 방법인 Binary Fission을 통해 번식한다. 이외에도 진핵생물인 Fungi에 속하는 이스트의 몇 가지 종도 Binary Fission을 한다. 2. Binary Fission Binary Fission은 가장 간단한 생식 방법 중 하나로, DNA 복제 후 세포 분열을 통해 두 개의 동일한 딸세포가 형성된다. 이러한 Binary Fission은 미생물의 유전적, 환경적 요소에 따라 생식 주기가 결정되며, 이...2025.05.06
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