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E. coli와 Yeast의 Cell Culture2025.05.061. Prokaryote Prokaryote는 핵막이 없는 원핵생물을 의미하며, 단세포생물일 경우가 많고 주로 무성 생식 방법인 Binary Fission을 통해 번식한다. 이외에도 진핵생물인 Fungi에 속하는 이스트의 몇 가지 종도 Binary Fission을 한다. 2. Binary Fission Binary Fission은 가장 간단한 생식 방법 중 하나로, DNA 복제 후 세포 분열을 통해 두 개의 동일한 딸세포가 형성된다. 이러한 Binary Fission은 미생물의 유전적, 환경적 요소에 따라 생식 주기가 결정되며, 이...2025.05.06
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Cell Culture and Cell Counting using a hemocytometer 보고서2025.01.211. 세포 배양 세포 배양은 동물이나 식물에서 채취한 세포를 인공적으로 조성된 환경에서 성장시키는 과정입니다. 세포 배양에는 세포 배양 플라스틱, 세포 배양 배지, 트립신 등이 사용됩니다. 세포 배양 시 무균 상태를 유지하고 각 세포 유형에 맞는 환경을 제공해야 합니다. 2. 세포 계수 세포 계수는 세포의 수를 측정하는 과정입니다. 트립판 블루 염색법을 이용하여 살아있는 세포와 죽은 세포를 구분할 수 있습니다. 혈구 계산기, 유세포 분석기, 쿨터 계수기 등 다양한 방법으로 세포를 계수할 수 있습니다. 3. NIH-3T3 세포 배양 ...2025.01.21
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원핵세포 배양 및 관찰 실험보고서2025.05.041. 원핵세포 원핵세포는 원핵생물을 구성하고 있고 개체가 단 하나로만 이루어진 단세포이다. 원핵세포는 하나의 염색체만 가지고 있고 진핵세포와 다르게 유사분열을 하지 않으며, 진핵세포보다 요구하는 영양분이 까다롭지 않아 세포배양에 주로 쓰인다. 또한 원핵세포는 다른 세포와 달리 세포주기가 매우 짧아 번식과 증식이 빠르다. 2. 세포배양 세포배양은 생물학 연구 전체에서 가장 유용한 기술이다. 세포배양의 장점은 단일 배양세포를 대량으로 얻을 수 있고 그 중 돌연변이의 관찰도 비교적 용이한 것이다. 초기의 조직배양은 명확하지 않은 물질이 ...2025.05.04
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세포 배양법2025.05.141. 세포 배양법 세포 배양은 생물체에서 분리해낸 세포를 체내 환경이 아닌 액체 배지, 고체 배지와 같은 외부 환경에서 키우는 것으로, 의과학과 생물학에서 자주 활용되는 기술이다. 세포 배양은 목적한 세포를 증식시키거나, 관찰하기 때문에 세포에 따라 온도, pH 등과 같은 적절한 생장 환경을 설정해야 한다. 일반적으로 배지에는 세포가 생명활동을 유지하기 위한 amino acid, glucose와 같은 영양분이 첨가되며, 때로는 목적한 세포를 제외하고 모두 제거하기 위해 항생물질을 첨가하기도 한다. 2. LB 배지 LB는 Lysoge...2025.05.14
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세포 배양2025.01.231. 세포 배양 이 실험은 세포 배양 및 계대 배양 실험으로, 세포의 성장 주기와 세포 배양 방법을 익히고 hemacytometer를 사용하여 세포 수를 계산하는 것이 목적입니다. 실험 과정에서는 배지 제거, HBSS를 이용한 세포 세척, T-EDTA를 이용한 세포 분리, DMEM(+)을 이용한 세포 중화, 원심분리, Trypan blue를 이용한 세포 계수 등의 방법을 사용합니다. 2. 세포 성장 주기 세포 배양 과정에서 관찰할 수 있는 세포 성장 주기는 다음과 같습니다. 1) 유도기(lag phase): 새로운 배지에 접종한 후...2025.01.23
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생명과학보고서_Immunostaining (아주대전공실험2)2025.05.161. Cell Culture Cell culture란 다세포 생물체로부터 분리한 세포를 protease 등의 처리로 단세포로 분리하여 배양하는 과정이다. 우선 생체조직을 무균적으로 선발하여 trypsin 등의 소화효소로 처리한 후 단세포로 분리하여 초대배양을 한다. 또 계대 중인 세포계나 세포주를 같은 효소처리로 분산시켜 얻어낸 단세포를 증식배지에 이식, 접종하여 다음의 계대배양을 한다. Culture condition은 세포 type에 따라 매우 다양하지만 기본 환경은 필수 영양소(탄수화물, 아미노산, 비타민), serum(호르몬...2025.05.16
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포유세포의 동결보존2025.01.021. 포유세포 동결보존 포유세포를 장기간 배양하면 오염이나 유전적 변이로 인해 세포가 소실되거나 변화할 수 있다. 따라서 세포를 동결보존하여 안정적으로 유지하고 보관하는 것이 중요하다. 동결보존 과정에서는 동결보호제를 사용하여 얼음 결정 형성을 억제하고 세포 손상을 방지한다. 대표적인 동결보호제로는 DMSO, glycerol, ethylene glycol 등이 있으며, 이들은 세포막을 투과할 수 있는 특성을 가지고 있다. 동결 및 해동 속도 또한 세포 생존에 중요한 요인이므로 주의해야 한다. 1. 포유세포 동결보존 포유세포 동결보존...2025.01.02
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세포 계대배양 실험2025.01.021. 세포 계대배양 세포 배양 시 한정된 공간에서 세포 증식이 제한되므로, 계대배양을 통해 새로운 공간을 제공하여 세포가 지속적으로 분열할 수 있도록 한다. 또한 실험에 사용되는 세포의 일관성을 보장하기 위해 유전적 특성이 동일한 세포주를 지속적으로 대를 이어 배양한다. 계대배양 시 세포를 분리하는 방법으로는 enzymatic dissociation과 physical dissociation이 있으며, 세포의 특성을 고려하여 적절한 방법을 선택해야 한다. 2. Trypsin의 작용 원리 Trypsin은 단백질 분해효소로, 세포가 다른...2025.01.02
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[일반생물학실험]원핵세포 배양 및 관찰2025.01.231. 원핵세포 배양 및 관찰 이번 실험은 사람의 손에 묻은 다양한 종류의 균을 관찰하기 위해 고체 배지에 접종하고 배양하여 세균들을 키운 다음, 음성균과 양성균이 얼마나 도포되어 있는지 모르기 때문에 음성과 양성을 구별하지 않는 단일염색법을 통해 세균의 형태를 관찰하였다. 그리고 증식한 세균 콜로니 하나를 액체 배지에 넣어 배양하고 다시 고체 배지에 도말하여 배양하면 어떤 모습을 띠는지 실험하였다. 1. 원핵세포 배양 및 관찰 원핵세포는 진핵세포와 달리 세포핵이 없는 단순한 구조를 가지고 있습니다. 이러한 원핵세포를 배양하고 관찰하...2025.01.23
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Cell harvest and protein assay2025.01.231. Cell harvest 세포 배양 시 adherent cell과 suspension cell로 구분할 수 있으며, adherent cell을 harvest하는 방법에는 화학적 방법(trypsin, accutase 사용)과 물리적 방법(scraper 사용)이 있다. 이번 실험에서는 물리적 방법인 scraper를 사용하여 adherent cell을 harvest하였다. 2. Protein extraction 세포 내 단백질을 추출하기 위해 lysis buffer와 phosphatase/protease inhibitor를 사용하여 ...2025.01.23
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