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PCR 관련 퀴즈 및 정답(생화학) A+ 과제레포트2025.01.201. PCR의 3단계 procedures PCR 반응요소에는 Target DNA, Primers (oligonucleotides complementary to target), Nucleotides(dATP, dCTP, dGTP, dTTP), Thermostable DNA polymerase가 있다. PCR의 세 가지 반응 단계는 DNA 변성 (Denaturation), primer 의 Annealing, 신장 반응 (Extension)이다. DNA 변성 단계에서는 95℃의 열을 가해 DNA 이중 가닥을 분리시킨다. Annealing...2025.01.20
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(RNA inteference를 사용한 유전자 억제 발현 시험)2025.01.231. Transformation Transformation은 분자생물학적 현상으로 박테리아 사이에서 외래 DNA 분자를 수평으로 전달하여 세포에 도입시켜 유전자가 재조합되는 현상이다. 실험실에서는 외부 DNA segment를 세포에 삽입하여 원하는 타겟 형질을 발현시키는 방법으로 사용하며, 최근에는 비세균성 세포인 animal/plant cell에 새로운 유전자를 삽입하는 경우까지 포함한다. 형질전환은 자연 상태에서도 일어나고 실험실에서도 유도할 수 있는데, 자연계에서는 starvation이나 cell density와 같은 조건에서...2025.01.23
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[생물학실험] evolution & development 결과레포트2025.05.031. 세균 및 원생생물 관찰 이번 실험에서는 그람염색을 통해 Escherichia coli와 Bacillus subtilis를 구분하고 세균의 분류 방법인 그람염색법의 원리를 파악하였다. 또한 짚신벌레, 유글레나, 해캄 등 다양한 원생생물을 현미경으로 관찰하여 각각의 특징과 운동성을 확인하였다. 2. 척추동물 관찰 이번 실험에서는 수컷 및 암컷 흰쥐를 해부하여 복강장기, 흉강장기, 뇌 등 내부 구조와 기관을 관찰하고 특징을 파악하였다. 실험동물 사용 시 윤리적 문제와 3R 원칙에 대해서도 고찰하였다. 3. 계통수 분석 이번 실험에서...2025.05.03
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[유전학] DNA sequencing, vector의 제작, NGS2025.05.031. DNA sequencing DNA는 단백질을 암호화 하고있는 물질로 A,T,G,C라는 기본 단위로 이루어진다. 어떤 서열을 갖고 있는 지에 따라 결과적으로 생산되는 단백질이 달라지게 되는데 이 서열을 확인하는 것은 분자생물학에 있어서 큰 의미가 있다. DNA sequencing은 그 DNA 서열을 확인하는 방법이다. 과거에는 그 방법으로 sanger method를 사용했지만 현재는 더욱 빠르고 신속하게 원하는 DNA서열을 확인할 수 있는 방법인 NGS를 통해 염기서열을 확인한다. 2. Vector 제작 우리는 DNA 재조합 기...2025.05.03
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PCR을 이용한 유전자 증폭 실험 예비 보고서2025.01.041. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA 중합효소를 이용하여 DNA나 RNA의 특정 영역을 시험관 내에서 대량으로 증폭시키는 기술입니다. 이를 통해 복잡한 전체 유전체 중에서 희귀한 유전자를 분석하고 연구할 수 있습니다. PCR은 분자생물학, 의학, 농학, 환경과학 등 다양한 분야에 응용될 수 있습니다. 2. PCR 구성 요소 PCR에는 증폭 대상이 되는 DNA/RNA 템플릿, 증폭할 부분을 지정하는 프라이머, 열에 강한 DNA 중합효소인 Taq 폴리머라제, 그리고 DNA 합성에 필요한 dNTP ...2025.01.04
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[A+ 리포트] Gel Extraction / Digestion & Purification (분자생물학실험)2025.04.251. Gel Extraction 겔 전기영동 과정으로부터 얻은 DNA 조각을 순수한 형태로 정제할 수 있다. 겔 추출로 얻은 순수한 DNA 조각을 제한효소를 이용하여 특정 부위를 잘라낼 수 있다. 2. Digestion 제한효소를 이용하여 Gel Extraction 산물로 얻은 DNA 조각을 특정 부위에서 절단할 수 있다. 제한효소 처리 시 주의사항으로는 제한효소 용액의 표면에서 취하고 강한 충격을 피하는 것이다. 3. Purification Digestion이 완료된 DNA 조각을 PB buffer, PE buffer 등을 이용하...2025.04.25
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Polymerase chain reaction2025.01.231. Polymerase chain reaction PCR(Polymerase chain reaction)은 단시간에 DNA의 원하는 부분을 수백만개 이상으로 증폭시키는 기술이다. PCR은 생물학의 거의 모든 분야에서 쓰이지 않는 곳이 없을 정도로 널리 퍼지고 중요한 실험적 기법이며, 그에 따라 상황과 목적, 기술발전에 따라 Multiplex PCR, Long-range PCR, Single-cell PCR등 수많은 파생 기술들이 존재한다. PCR은 크게 Denaturation, Annealing, Extension의 세 과정으로 ...2025.01.23
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PCR을 통한 gene structure 분석2025.05.011. EtOH Precipitation DNA는 전하를 띄는 인산골격을 가지고 있어서 극성이다. 물도 극성이므로 물에 잘 녹는다. DNA를 뭉치게 하려면 물과 DNA간 결합을 약화시켜야 한다. Ethanol은 물보다 훨씬 덜 극성이다. 따라서 ethanol을 첨가하면 DNA의 인산기와 다른 양이온간의 결합이 강해지면서 DNA 침전을 형성한다. 이 과정을 위해선 적절한 양의 양이온이 필요하다. 너무 많으면 DNA와 같이 침전되고 너무 적으면 침전되지 못한 DNA가 생긴다. 이 실험에선 3M sodium acetate를 final 0....2025.05.01
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[일반생물학실험] Plasmid DNA - 전기영동2025.01.031. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 DNA를 크기에 따라 분리하는 기술입니다. DNA는 인산기를 가지고 있어 전기영동 완충용액에서 음전하를 띠게 되며, 전류를 흘려주면 양극 쪽으로 이동하게 됩니다. DNA 분자량이 클수록, agarose 농도가 높을수록, 전압이 낮을수록 이동속도가 느려집니다. 또한 DNA 구조에 따라서도 이동속도가 달라집니다. 전기영동 후 ethidium bromide로 염색하면 UV 조사 시 형광을 발하여 DNA를 확인할 수 있습니다. 1. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 생명과학 분야에서 매우 중요한 기술...2025.01.03
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PlasmidDNA Purification & Sanger Sequencing 보고서2025.01.211. Bacterial transformation 박테리아 transformation은 특정 DNA 조각을 박테리아의 유전체 내로 삽입하여 새로운 유전형질이 발현되도록 하는 방법입니다. 박테리아 plasmid는 restriction enzyme이 작용하는 multicloning site와 항생제 내성 유전자를 가지고 있어 외부 유전 물질을 자유롭게 삽입할 수 있습니다. 이를 통해 약 8kb의 긴 DNA 조각을 박테리아 plasmid에 삽입하여 복제할 수 있습니다. 2. Liquid LB culture 및 Colony inoculat...2025.01.21
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