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PCR 관련 퀴즈 및 정답(생화학) A+ 과제레포트2025.01.201. PCR의 3단계 procedures PCR 반응요소에는 Target DNA, Primers (oligonucleotides complementary to target), Nucleotides(dATP, dCTP, dGTP, dTTP), Thermostable DNA polymerase가 있다. PCR의 세 가지 반응 단계는 DNA 변성 (Denaturation), primer 의 Annealing, 신장 반응 (Extension)이다. DNA 변성 단계에서는 95℃의 열을 가해 DNA 이중 가닥을 분리시킨다. Annealing...2025.01.20
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(RNA inteference를 사용한 유전자 억제 발현 시험)2025.01.231. Transformation Transformation은 분자생물학적 현상으로 박테리아 사이에서 외래 DNA 분자를 수평으로 전달하여 세포에 도입시켜 유전자가 재조합되는 현상이다. 실험실에서는 외부 DNA segment를 세포에 삽입하여 원하는 타겟 형질을 발현시키는 방법으로 사용하며, 최근에는 비세균성 세포인 animal/plant cell에 새로운 유전자를 삽입하는 경우까지 포함한다. 형질전환은 자연 상태에서도 일어나고 실험실에서도 유도할 수 있는데, 자연계에서는 starvation이나 cell density와 같은 조건에서...2025.01.23
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[일반생물학실험] Plasmid DNA - 전기영동2025.01.031. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 DNA를 크기에 따라 분리하는 기술입니다. DNA는 인산기를 가지고 있어 전기영동 완충용액에서 음전하를 띠게 되며, 전류를 흘려주면 양극 쪽으로 이동하게 됩니다. DNA 분자량이 클수록, agarose 농도가 높을수록, 전압이 낮을수록 이동속도가 느려집니다. 또한 DNA 구조에 따라서도 이동속도가 달라집니다. 전기영동 후 ethidium bromide로 염색하면 UV 조사 시 형광을 발하여 DNA를 확인할 수 있습니다. 1. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 생명과학 분야에서 매우 중요한 기술...2025.01.03
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CRISPR/Cas9 / 유전자 가위 / 분자생물학 레포트2025.05.101. 유전자 가위기술 유전자 가위기술은 기존의 의학적 방법으로 치료가 어려운 다양한 난치성 질환에 대하여 문제가 되는 유전자를 제거하거나 정상적인 기능을 하도록 유전자를 편집 또는 삽입함으로써 근원적인 치료를 할 수 있는 기술입니다. 유전자 가위기술은 1세대 ZFN, 2세대 TALEN, 3세대 CRISPR/Cas9으로 발전해왔습니다. 2. CRISPR/Cas9 시스템 CRISPR/Cas9은 세균의 면역반응에 관여하는 단백질에서 유래한 것으로 외부에서 침입한 바이러스 유전자를 절단함으로서 박테리아를 보호하는 기능을 가집니다. CRIS...2025.05.10
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유전공학 기술 (DNA 분리 및 정제, PCR, 재조합 DNA)2025.04.301. 유전공학 유전공학은 DNA의 인위적인 변형을 통해 유전물질을 변화시키는 기술로, 의약품 분야, 환경, 농축산 분야 등에 활용되고 있다. 주요 기술로는 DNA 분리 및 정제, 재조합 DNA, PCR(중합 효소 연쇄반응) 등이 있다. 2. DNA 분리 및 정제 플라스미드 DNA는 유전공학적 실험에서 vector DNA로 사용되며, 알칼리 용해법을 통해 분리할 수 있다. 이 방법은 세포막을 파괴하고 DNA를 변성시켜 플라스미드 DNA를 추출한다. 3. 재조합 DNA 재조합 DNA 기술은 연구하고자 하는 유전자를 세균의 플라스미드에 ...2025.04.30
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DNA - EtBr 염색, Methylene blue 염색2025.05.111. DNA 구조 DNA는 이중나선 구조로 구성되어 있으며, 두 가닥의 DNA가 거의 공통된 축의 주위를 오른쪽으로 감고 있다. 이 구조는 DNA에 있는 화학 결합이 비틀림을 만들어내며, 그 결과 안정성을 가지게 해준다. 또한 이중나선 구조 안쪽에 있는 염기를 보호하기에 적절하다. 최근에는 다양한 유전자 치료법에서 잘못된 염기서열을 교정할 때 두 가닥의 상보성을 활용하기도 한다. 2. DNA 염색 방법 DNA 염색 방법에는 EtBr(Ethidium bromide)과 Methylene blue 염색 방법이 있다. EtBr은 DNA의 ...2025.05.11
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분자생물학실험 Gene cloning_TAE buffer 제작2025.04.271. TAE buffer 제작 TAE buffer 제작(30ml 50X TAE buffer)의 목적, 재료, 방법 등을 자세히 설명하고 있습니다. TAE buffer는 DNA 전기영동에 사용되는 완충액으로, Tris, acetic acid, EDTA 성분으로 구성됩니다. 제작 방법은 각 성분의 양을 계산하여 증류수와 혼합하고 멸균하는 과정으로 이루어집니다. 2. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 증폭 기술로, DNA 중합효소를 사용하여 원하는 DNA 염기서열을 대량으로 증폭시킬 수 있습니다. PCR에 필요한 주요 요소는 주...2025.04.27
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A+ 생화학실험 <9주차. DNA Digestion & Gel Extraction> 레포트2025.01.201. 제한효소 (Restriction enzyme) 제한 효소는 DNA 사슬의 중간 부분에서 특정한 절단 부위(restriction site)를 인식하여 절단하는 endonuclease 범주에 속하며, restrictase라 부르기도 한다. 이들은 주로 박테리아나 고세균에서 바이러스로부터의 침입을 방어하는 메커니즘의 일부로 작용하며, 원핵 생물에서는 이들이 외부 DNA만을 선택적으로 절단하는 restriction digestion을 수행한다. 제한효소는 DNA modification과 molecular cloning 분야에서 중요한...2025.01.20
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연세대(미래) 13주차. DNA분리2025.05.031. DNA 구조 DNA는 인산기, deoxyribose, 4종류의 질소염기로 구성되며, 두 개의 DNA 가닥이 서로 마주보고 있는 상태에서 당-인산-당 골격이 바깥쪽에 위치하고, 두 사슬의 염기들이 수소결합에 의해 쌍을 이루고 있다. A는 항상 T와, G는 항상 C와 쌍을 이루는 상보적인 염기쌍 구조를 가진다. 2. 중심원리 중심원리에 따르면, DNA를 주형으로 하여 RNA를 복사해내는 전사 과정과, 전사된 mRNA가 세포질에서 번역되어 단백질로 전환되는 번역 과정이 있다. 원핵세포의 경우 전사와 번역이 동시에 일어날 수 있다. ...2025.05.03
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플라스미드 미니 준비 발표2025.01.061. 플라스미드 플라스미드는 박테리아가 가진 염색체 이외의 DNA 분자입니다. 1952년 미국의 유전학자 J. 레더버그가 최초로 플라스미드를 발견했으며, 이는 박테리아가 독자적으로 증식할 수 있는 DNA 분자라는 의미로 명명되었습니다. 플라스미드는 유전공학에서 중요한 역할을 하며, 플라스미드 준비는 플라스미드 DNA를 추출하고 정제하는 과정입니다. 2. 플라스미드 미니 준비 플라스미드 미니 준비는 박테리아로부터 소량의 플라스미드 DNA를 추출하고 정제하는 방법입니다. 이 방법은 많은 후보를 빠른 시간 내에 분석할 수 있게 해줍니다....2025.01.06
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