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Western blot 실험 방법2025.05.101. Western blotting Western blotting (immunoblotting)은 샘플 내 특정 단백질의 존재 여부, 양, 크기를 측정하는 실험이다. 단백질이 소량이어도 검출 가능하고, 다양한 종류의 단백질이 혼합된 시료를 검사할 때도 항체의 기질 특이성 덕분에 원하는 단백질만 검출할 수 있다는 장점이 있다. 2. Western blot 실험 순서 Western blot 실험은 크게 5개의 순서로 이루어진다. 1) SDS-PAGE를 시행하여 단백질을 크기별로 분리, 2) 분리된 단백질을 membrane에 전이, 3)...2025.05.10
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단백질 검출 실험보고서2025.11.141. 뷰렛반응(Biuret Reaction) 뷰렛 시약은 단백질과 폴리펩티드를 검출하기 위해 사용되는 시약으로, 원래 푸른색을 나타내나 단백질과 반응하면 자주색을 나타낸다. 알칼리성 CuSO₄와 반응하여 보라색의 착화합물을 만들며, 두 개 이상의 펩티드 결합을 가진 화합물도 유사한 착화합물을 만든다. 이 방법으로는 약 1~10mg의 단백질을 정량할 수 있으며, 미량 뷰렛법은 약 0.25~2.0mg까지 정량 가능하다. 착화합물의 색은 1~2시간 동안 안정하지만 그 이상의 시간에서는 색도가 증가한다. 2. 닌하이드린 반응(Ninhydr...2025.11.14
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닌히드린 반응을 이용한 단백질 검정 실험2025.11.141. 아미노산 아미노산은 아미노기(-NH2)와 카르복시기(-COOH)를 가진 유기화합물로, 모든 단백질의 기본 구성단위입니다. 인체에서 단백질 생성에 사용되는 아미노산은 20종류이며, 알킬기(R)에 따라 종류가 결정됩니다. 아미노산은 양쪽성 물질로 산과 염기 모두로 작용할 수 있으며, 극성 여부와 산성/염기성에 따라 분류됩니다. 필수 아미노산은 체내에서 합성할 수 없어 식품으로 섭취해야 하며, 성인에게는 9가지 필수 아미노산이 있습니다. 2. 단백질 구조 단백질은 여러 아미노산이 펩티드 결합으로 연결된 고분자 유기물입니다. 단백질의...2025.11.14
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아미노산 및 단백질의 정성분석 실험2025.11.121. 아미노산의 구조와 분류 아미노산은 아미노기(-NH2)와 카르복실기(-COOH)를 가진 유기화합물로, 단백질을 구성하는 기본 단위입니다. 표준 아미노산 20종은 글리신, 알라닌, 발린 등이 있으며, 기능에 따라 필수아미노산과 비필수아미노산으로 구분됩니다. 구조적으로는 지방족, 방향족, 함황 아미노산 등으로 분류되며, 각 아미노산은 고유한 화학적 성질과 생리적 역할을 가집니다. 2. 단백질의 정색반응 원리 단백질 정성분석에는 여러 발색반응이 사용됩니다. 닌히드린 반응은 아미노기와 반응하여 청자색을 생성하고, 크산토프로테인 반응은 ...2025.11.12
