1. Transformation Transformation은 특정 DNA 조각을 생명체의 유전체 내로 삽입하여 새로운 genotype이 발현되도록 하는 방법이다. 박테리아에 plasmid를 통해 gene을 도입하는 기술로 알려져 있지만, 동물이나 식물에서도 transformation 기술이 개발되어 유전자 변형 생물(GMO)을 만드는 기술로 이용되고 있다. Bacterial plasmid는 restriction enzyme이 작용하는 multicloning site와 Selectable Marker로 사용하기 위한 antibioti...

1. 형질전환(Transformation)과 Competent Cell 형질전환은 외부 DNA가 세포 내부로 들어와 세포의 형질이 바뀌는 현상이다. Competent cell은 외부 DNA를 받아들일 수 있는 상태의 박테리아 세포로, CaCl2 처리와 열충격을 통해 인위적으로 제조된다. DH5α 대장균을 사용하여 log phase(OD600=0.4~0.6)에서 CaCl2와 glycerol로 처리하면 형질전환 효율이 10^9 CFU/μg에 도달한다. 형질전환 효율은 (CFU on plate/pg DNA) × 10^6 × (total ...