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Lowry-Folin법을 이용한 단백질 정량 (생화학 실험)2025.01.161. 단백질 정량 실험 목적은 Lowry 방법으로 수용액에 녹아 있는 단백질의 양을 정량하는 것입니다. 이를 위해 표준 용액을 이용한 표준 곡선의 작성과 비색정량법을 습득합니다. Lowry 단백질 분석법은 강알칼리 조건에서 구리 이온과 펩타이드 결합의 반응, 그리고 Folin-Ciocalteu 시약과의 반응을 통해 단백질을 정량합니다. 이 방법은 트립토판, 시스테인, 티로신 등의 아미노산과 반응하여 발색되는 원리를 이용합니다. 2. 분광광도법 분광광도법은 물질에 의한 빛의 흡수 현상을 이용하여 화학물질의 양을 정량하는 방법입니다. ...2025.01.16
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아주대 생실1) 효소반응 보고서2025.05.101. 물질대사 물질대사는 생물의 세포에서 생명을 유지하기 위해 일어나는 화학 반응으로, 효소에 의해 촉매된다. 이화작용은 복잡한 물질을 분해하여 에너지를 얻는 과정이며, 동화작용은 에너지를 이용하여 작은 분자로부터 세포 구성 물질을 합성하는 과정이다. 2. 활성화에너지 반응물은 특정 화학 결합에 대한 결합 에너지를 극복하고 결합이 끊어질 만큼 충분한 에너지가 공급되어야 화학 반응이 일어난다. 이때 넘어야 하는 에너지 장벽을 활성화에너지라고 한다. 3. 효소 효소는 생체 내의 화학반응을 매개하는 단백질 촉매로, 특정 반응물과 결합하여...2025.05.10
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[만점자료] DNA전기영동과 SDS-PAGE 실험 보고서2025.01.231. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 PCR을 통해 유전자를 증폭시킨 후, 전기를 이용해 DNA를 크기별로 분리하는 기술이다. PCR은 DNA 변성, Primer 부착, 신장 과정을 거치며 유전자를 지수적으로 증폭시킬 수 있다. 아가로오스 겔 전기영동은 한천을 이용해 만든 겔을 통해 DNA를 크기별로 분류할 수 있다. 실험 결과에서는 원래 플라스미드, 제한효소 처리 플라스미드, PCR 증폭 산물 등의 밴드를 확인할 수 있었다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 SDS를 이용해 단백질에 균일한 음전하를 부여하고, 폴리아크릴아마...2025.01.23
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Peptide 질량분석2025.01.231. 펩타이드 질량분석 단백질은 20종류의 아미노산들이 여러 개 연결된 폴리펩타이드 사슬이며, 펩타이드는 둘 이상의 아미노산이 탈수축합반응을 통해 결합된 것이다. MALDI-TOF 질량분석법은 분석 물질에 자외선을 흡수하는 matrix를 넣고 레이저로 기화시켜 기체상 이온을 만들어 질량/전하수 값을 측정하는 방법이다. 실험에서는 단백질을 트립신으로 가수분해한 펩타이드 용액을 CHCA matrix와 혼합하여 MALDI-TOF 질량분석을 수행하였고, 얻어진 펩타이드 질량지문으로부터 주어진 단백질을 동정하였다. 2. MALDI-TOF 질...2025.01.23
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사후경직이 발생되는 이유에 대해 토론하시오2025.01.281. ATP 고갈로 인한 근육의 수축과 경직 사후경직의 핵심 원인은 근육 수축과 이완에 필수적인 에너지원인 ATP(아데노신삼인산)의 고갈이다. 살아 있는 동안 ATP는 칼슘 이온을 근소포체로 되돌려보내 근육이 이완 상태를 유지하도록 돕는다. 그러나 사망 후 ATP 생산이 중단되면 칼슘 이온이 근육 세포 내부에 머물게 되어 미오신과 액틴 필라멘트 간의 결합이 지속되고, 근육은 수축 상태로 고정된다. 이러한 생리적 변화는 사망 후 약 48시간이 지나면서 부패 과정에 의해 ATP 부족으로 굳어졌던 근육이 다시 풀리게 된다. 2. 단백질 ...2025.01.28
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서울대학교, 화학실험, 만점, A+, 캐털레이즈의 반응속도 결과보고서2025.01.291. 캐털레이즈 반응 속도 본 실험에서는 감자즙에 포함된 효소 캐털레이즈를 활용하여 과산화수소 분해 반응의 초기 속도 및 효소 반응의 특성을 분석하였다. 실험 결과, 과산화수소의 농도가 증가할수록 초기 반응 속도가 증가하였으며, 이는 효소의 기질 농도에 따른 반응 속도를 설명하는 Michaelis-Menten 모델과 일치함을 확인할 수 있었다. 효소가 변성된 경우, 반응 속도가 현저히 감소하였으며, 이를 통해 효소의 구조적 안정성이 반응 속도에 중요한 영향을 미친다는 점을 확인할 수 있었다. 또한, Michaelis-Menten P...2025.01.29
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BRADFORD 단백질 정량법을 이용한 온도변화에 따른 유청단백질의 농도 측정(추가실험)2025.05.121. Bradford 단백질 정량법 Bradford 단백질 정량법은 쿠마시블루와 단백질의 특정 아미노산의 결합력을 이용하여 단백질을 정량하는 방법입니다. 쿠마시블루 G-250 염색약이 산성 환경에서 단백질(염기성 및 방향족 곁 사슬을 갖는 아미노산)과 결합하면 푸른색으로 변하게 됩니다. 이 과정에서 단백질의 소수성 부위가 노출되어 염색약과 반데르발스 힘으로 비공유결합을 이루고, 양전하를 띠는 아민기와 염색약의 음전하 부위가 이온결합을 이루면서 단백질과 염색약의 결합이 더욱 강화됩니다. 2. 온도에 따른 단백질 변성 이 실험에서는 프...2025.05.12
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SDS-PAGE를 통한 단백질 분리 실험2025.01.031. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질을 분자량에 따라 분리하는 기법으로, 단백질을 SDS로 변성시켜 모든 단백질이 유사한 전하/분자량 비를 가지도록 만든 후 전기영동을 통해 분리한다. 이 실험에서는 SDS-PAGE의 원리와 사용되는 시약들의 특성을 이해하고, 실제로 단백질 분리 실험을 진행하여 결과를 분석하였다. 2. 단백질 변성 SDS는 단백질의 3차원 구조를 풀어 선형 구조로 만들어 주며, 단백질에 음전하를 부여한다. 이를 통해 단백질의 고유 전하와 상관없이 분자량에 따라 분리할 수 있게 된다. 실험에서는 단백질 시료를...2025.01.03
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캐털레이즈의 반응속도2025.01.231. 효소 효소는 특정 반응에 직접 참여하지는 않으나 그 반응을 매개하여 반응속도를 빠르게, 또는 느리게 바꾸는 촉매물질이다. 효소는 아미노산 사슬, 즉 폴리펩타이드인 단백질이며, 이 단백질 구조에 따라 효소는 각각 특이적인 형태를 가진다. 따라서 효소가 기질(substrate)와 반응할 때, 기질은 효소의 활성 부위(active site)에 결합하는데, 이 활성 부위가 효소의 단백질 구조에 따라 결정되게 된다. 효소는 기질과 결합하여 효소-기질 복합체(ES)를 형성하며, 이 복합체가 다시 효소와 기질로 돌아오거나 빠르게 생성물을 ...2025.01.23
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레닌저 생화학 정리노트 Ch04. 단백질의 3차원 구조2025.05.101. 단백질의 3차원 구조 단백질의 3차원 구조는 주로 약한 상호작용에 의해 안정화되며, 4단계로 구성됩니다. 1단계는 아미노산이 공유적으로 연결되는 것이고, 2단계는 3차원 배열인 a 나선과 b 시트 형태입니다. 3단계는 단백질 사슬과 보결분자단을 포함한 모든 원자의 3차원 배열이며, 4단계는 subunits의 배열입니다. 단백질의 3차원 구조는 specific biological function을 결정하며, 이를 native fold라고 합니다. 단백질에서 다수의 호의적인 상호작용, 즉 소수성 효과, 수소 결합, London d...2025.05.10