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생명과학실험 DNA 및 플라스미드 정제 예비보고서2024.10.091. 플라스미드 DNA 정제 1.1. 플라스미드의 특성 플라스미드는 박테리아 세포의 염색체와는 별도로 존재하며 독자적인 복제가 가능한 원형의 DNA 분자이다. 플라스미드는 보통 30개 이하의 적은 수의 유전정보를 가지고 있어 염색체 DNA에 비해 크기가 매우 작다. 플라스미드는 세균 세포 내에서 독립적으로 복제될 수 있는데, 이는 플라스미드가 자체적인 복제 기작을 가지고 있기 때문이다. 플라스미드는 세균 세포에서 생명 유지에 필수적이지는 않지만 때로는 생존에 도움을 줄 수 있다. 대표적인 예로, 플라스미드가 항생제 내성 유전자...2024.10.09
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생명과학 실험 플라스미드 DNA 정제2024.10.091. 실험 개요 1.1. 실험 목적 Plasmid DNA의 원형을 유지하려는 구조적 특성을 이용하며 alkaline lysis prep method를 이용하여 plasmid DNA를 분리해본다. DNA Purification을 한 후 Agarose gel 전기영동을 통해 DNA를 크기별로 분리하여 확인한다. 1.2. 실험 원리 플라스미드(Plasmid)는 DNA에 존재하는 유전자 정보 중 염색체(chromosome) DNA와는 별도로 독립적으로 복제되는 대표적인 에피솜(episome) DNA 분자이다. 플라스미드 DNA는 일반적으...2024.10.09
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전기영동2024.10.111. 전기영동을 통한 DNA 분석 1.1. 전기영동의 원리 전기영동의 원리는 다음과 같다. 전기영동은 전기장 안에서 하전된 입자가 양극 또는 음극으로 이동하는 현상을 이용한 기술이다. 이동하는 속도는 입자의 전하량, 크기와 모양, 용액의 pH와 점성도, 용액에 있는 다른 전해질의 농도와 이동의 세기, 지지체의 종류 등 여러 요인에 따라 달라진다. 즉, 분자 자체의 성질에 따라 이동 속도가 결정된다. 전기영동법은 아미노산, 뉴클레오타이드, 단백질과 같은 하전된 물질을 분리하거나 분석하는데 매우 효과적으로 사용된다. 아가로스 젤은 완...2024.10.11
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플라스미드 재조합2024.11.111. 플라스미드 재조합 이론과 방법 1.1. 목적 PCR로 증폭된 DNA를 플라스미드 벡터에 삽입을 한 후 competent cell을 형질전환을 시키는 것이 이 실험의 목적이다. 이를 통해 재조합 플라스미드를 대량으로 증폭하여 유전자 재조합 기술을 이용한 단백질 대량 생산 등의 응용을 목표로 하고 있다. 1.2. 실험 재료 TA Cloning에 사용되는 실험 재료는 다음과 같다. PCR product 5ul, Ligase 1ul, Ligase buffer 7.5ul, T-vector, DW 2.5ul, 원심분리기이다. Compe...2024.11.11
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plasmid의 restriction site, 형질전환의 방법(heat shock법, 전기천공법2025.05.221. 서론 1.1. plasmid의 restriction site 플라스미드의 restriction site 제한효소는 DNA의 특정한 염기 서열을 인식하고 그 부위를 절단하는 효소이다. 플라스미드 DNA에는 제한효소가 인식할 수 있는 여러 개의 염기서열이 존재하며, 이를 restriction site라고 한다. 이러한 restriction site는 플라스미드 DNA에 외부 유전자를 삽입하는데 활용된다. 제한효소는 주로 Ⅱ형 제한효소가 많이 사용되는데, Ⅱ형 제한효소는 palindromic sequence라고 불리는 특정 ...2025.05.22
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