소개글
"그람염색 실험목적"에 대한 내용입니다.
목차
1. 그람 염색 및 세균 염색
1.1. 염색의 목적
1.2. 고정
1.3. 염색의 종류
1.3.1. 단순 염색
1.3.2. 대조 염색
1.3.3. 그람 염색
1.4. 그람 양성균과 그람 음성균의 특성
1.5. 그람 염색 과정
1.6. 광학 현미경
1.6.1. 명시야 현미경
1.6.2. 위상차 현미경
1.6.3. 암시야 현미경
1.6.4. 형광 현미경
1.6.5. 공초점 현미경
1.7. 현미경 사용법
1.7.1. 일반 검경법
1.7.2. 유침법
1.7.3. Wet mount
2. 참고 문헌
본문내용
1. 그람 염색 및 세균 염색
1.1. 염색의 목적
염색의 목적은 세 가지로 정리할 수 있다.
첫째, 표본의 가시성(visibility)을 높이는 것이다. 염색을 통해 세포나 세균의 구조와 형태를 명확히 관찰할 수 있도록 한다. 특히 세균과 같이 크기가 작고 투명한 미생물은 염색을 거치면 현미경으로도 쉽게 관찰할 수 있게 된다.
둘째, 표본의 형태학적 특징을 두드러지게 하는 것이다. 염색 시 사용되는 염료는 세포 내 특정 물질과 결합하여 세포 구조와 성분을 강조하여 보여준다. 이를 통해 세균의 형태, 배열, 포자 형성 등을 관찰할 수 있게 된다.
셋째, 표본을 보존하는 것이다. 열 고정이나 화학 고정을 통해 세포의 형태와 구조를 유지할 수 있다. 이렇게 고정된 표본은 장기간 보관이 가능하며, 현미경 관찰에도 용이하다.
따라서 염색은 생물학 및 미생물학 실험에서 필수적인 기법으로, 미세한 생물체의 관찰과 분석을 가능하게 하는 중요한 역할을 한다.
1.2. 고정
고정은 현미경 관찰을 위해 세포나 조직을 원래의 형태와 구조를 유지하도록 처리하는 과정이다. 고정은 크게 열 고정(heat fixation)과 화학 고정(chemical fixation)으로 나뉜다.
열 고정은 슬라이드 글라스에 도말된 세균을 알코올 램프 불꽃에 몇 번 노출시켜 세포를 고정하는 방법이다. 열에 의해 세포막이 수축하고 변형되어 세포가 슬라이드 글라스에 부착된다. 이를 통해 세균이 슬라이드에서 떨어지지 않고 고정된다. 단, 너무 오랫동안 가열하면 세포가 손상될 수 있으므로 주의해야 한다.
화학 고정은 화학약품을 이용해 세포의 구조를 고정하는 방법이다. 대표적으로 포르말린, 글루타르알데하이드, 메탄올 등이 사용되며, 이들 화학약품이 단백질, 지질, 핵산 등의 세포 성분을 가교결합시켜 세포의 원래 형태를 유지하도록 한다. 화학 고정은 열 고정에 비해 세포 구조가 더 잘 보존되지만, 시간이 오래 걸리고 시약 처리 과정이 복잡하다는 단점이 있다.
고정의 목적은 현미경 관찰을 위해 세포의 형태와 구조를 손상 없이 유지하는 것이다. 이를 통해 세포의 미세구조, 세포 내 소기관의 위치와 형태 등을 자세히 관찰할 수 있다. 또한 고정된 세포는 염색 과정에서 세포 성분이 빠져나가는 것을 막아 염색 효과를 높일 수 있다.
1.3. 염색의 종류
1.3.1. 단순 염색
단순 염색법은 세균을 슬라이드에 도말 고정시킨 후, 한 가지 염색액을 이용해 염색하는 방법이다. 단순 염색법의 목적은 세포의 전체적인 크기나 모양을 관찰하는 데 있다. 때로는 매염제(mordant)라는 화학물질을 처리하여 염료분자가 시료에 보다 단단하게 달라붙을 수 있도록 하기도 한다.
단순 염색에 사용되는 대표적인 염료로는 Methylene Blue, Crystal Violet 등이 있다. 이러한 염료를 사용해 미생물을 염색시키면 세포의 구조나 모양 등을 더 쉽게 관찰할 수 있게 된다. 단순 염색법은 광학 현미경으로 혼합물을 관찰하기 위한 표본을 준비하는 데에도 사용된다.
단순 염색법은 미생물의 일반적인 특성을 관찰하는 데 유용하지만, 세균을 그람 양성균과 그람 음성균으로 구분하거나 특정 구조물을 확인하는 데에는 적합하지 않다. 이러한 경우에는 대조 염색법 중 하나인 그람 염색법을 사용해야 한다.""
1.3.2. 대조 염색
대조 염색은 단일 염색법과 달리 세균을 구별하기 위한 목적으로 사용되는 염색 방법이다. 단일 염색법이 세균의 전체적인 형태와 크기를 관찰하는 것에 초점을 맞추는 반면, 대조 염색은 세균의 성질이나 구조적 특징을 구분하기 위한 것이다.
그람 염색법이 대표적인 대조 염색 방법이다. 그람 염색법은 세균을 그람 양성균과 그람 음성균으로 구분하는 데 사용된다. 그람 양성균은 염색 후 보라색을 띠고, 그람 음성균은 붉은색을 띤다. 이는 세균 세포벽의 구조적 차이에 기인한다.
그람 양성균은 세포벽에 두꺼운 펩티도글리칸 층을 가지고 있어 염료와 결합한 복합체가 세포 내부에 남아있게 되지만, 그람 음성균의 경우 상대적으로 얇은 펩티도글리칸 층과 외막으로 이루어진 세포벽 구조로 인해 염료 복합체가 세포 밖으로 빠져나가게 된다. 따라서 그람 음성균은 대조 염색약인 사프라닌(safranin)에 의해 붉은 색으로 염색된다.
이처럼 그람 염색법은 간단하고 빠르게 세균의 특성을 구분할 수 있어 감염성 질환의 진단에 널리 사용되고 있다. 또한 세균의 생리적 특성과도 깊은 관련이 있어 미생물학 연구에서 기초적인 방법으로 활용되고 있다.
1.3.3. 그람 염색
그람 염색은 1884년 덴마크의 세균학자인 한스 크리스티안 그람에 의해 처음 개발된 방법으...
참고 자료
Lisa A. Urry/캠벨 생명과학포커스 2판/2017/(주)바이오사이언스출판/p. 478-479, 488-489.
그람음성균/네이버지식백과-그람음성균/https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1068862&cid=40942&categoryId=32333
그람양성균/네이버지식백과-미생물학백과/https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5144715&cid=61232&categoryId=61232
펩티도글리칸[peptidoglycan]/네이버지식백과-생화학백과/https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5733554&cid=60266&categoryId=60266
그람염색이란 무엇인가?/네이버지식백과-건강백과/https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=2833966&cid=55649&categoryId=55649
세균염색법/네이버지식백과-식품과학기술대사전/https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=294480&cid=60262&categoryId=60262
Dovid Clark 외 3명, 『 BROCK의 미생물학 12판 』, 오계헌 역, 바이오사이언스, 2009, p.26-30.
위의 책, p.80-83.
오현근 외 4명, 『 현대 식품미생물학 및 실험 』, 지구문화사, 2001, p.301-312.
Dovid Clark 외 3명, 『BROCK의 미생물학 13판』, 오계헌 역, 피어슨에듀케이션코리아, 2011, p.53-57.
한국 임상미생물학 교수회, 『 최신 미생물학 실험 』, 고려의학, 2007, p.55-79.
오세욱 외 3명, 『 식품미생물학 』, 파워북, 2014, p.68-87.
네이버 지식백과, 「 현적표본 」, 생명과학대사전, 2019.04.18
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=434041&cid=60261&categoryId=60261
네이버 지식백과, 「 수산화칼륨 」 , (화학대사전, 2001. 5. 20., 세화), 2019.04.19
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=2294935&cid=60227&categoryId=60227
네이버 지식백과, 「 옥살산암모늄 」 , (화학대사전, 2001. 5. 20., 세화), 2019.04.19
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=2303221&cid=60227&categoryId=60227
네이버 지식백과, 「 그람양성균 」 , 두산백과, 2019.04.18
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1068859&cid=40942&categoryId=32333
네이버 지식백과, 「 그람음성균 」 , 두산백과, 2019.04.18
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1068862&cid=40942&categoryId=32333
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=425673&cid=60261&categoryId=60261
미생물•면역 분과학회, 실험 미생물학(2013), 라이프사이언스
김종배 역, 병원 미생물학(2017), 라이프사이언스
https://www.redbubble.com/people/stanleyillust/works/21341791-gram-positive-vs-gram-negative-bacteria (그람 음성균, 양성균 사진)
https://www.scienceall.com/광학-현미경-optical-microscope-光學顯微鏡/?term_slug=science_pedia&sa_term=scidictionary
https://www.bing.com/images/search?view=detailV2&ccid=qcEl6M9E&id=519ECD56DFF14775A31FC5D3F47ADEDDC44FBD41&thid=OIP.qcEl6M9EGKIikJwn8MUUpAHaE2&mediaurl=http%3a%2f%2ffce-study.netdna-ssl.com%2f2%2fimages%2fupload-flashcards%2f80%2f04%2f65%2f9800465_m.png&exph=157&expw=240&q=e+coli+wet+mount&simid=608034438990071569&selectedIndex=283&ajaxhist=0
