소개글
"페이퍼 디스크"에 대한 내용입니다.
목차
1. 서론
2. paper disc Methods
2.1. 목적
2.2. 준비물
2.3. 실험 방법
2.3.1. 항생제 disc 만들기
2.3.2. 균의 도말
2.3.3. Disc 심기
2.4. 주의사항
3. 결과
4. 고찰
4.1. paper disc Methods의 이해
4.2. 대장균과 항생제의 작용
4.3. 항생제 농도와 확산의 관계
4.4. 배양 환경 조성의 중요성
5. 과제
5.1. 항균 검사 방법 조사
5.2. 항생제 기작 조사
6. 참고 문헌
본문내용
1. 서론
항생제는 미생물이 생산 분비하는 물질로 다른 미생물의 증식을 저지하거나 사멸시키는 능력을 갖고 있다. 미생물의 증식을 억제하는 항생제는 정균제라 부르며, 미생물을 사멸시키는 항생제는 살균제라 부른다. 항생제는 세균의 세포벽 합성, 세포막 기능, 단백질 합성, 핵산 합성, 엽산 합성 등 다양한 기작으로 작용한다. 항생제에 대한 미생물의 감수성은 예측하기 어려우므로, 특정 항생제에 대한 병원균의 감수성을 측정하는 시험이 필요하다. 대표적인 감수성 검사로는 디스크 확산법과 최소억제농도 측정법이 있다. 이 실험에서는 디스크 확산법을 통해 대장균의 항생제 감수성을 분석하고자 한다.
2. paper disc Methods
2.1. 목적
Disc diffusion의 개념을 이해하고, 항생제를 이용한 생장억제 실험을 통해 clean zone을 관찰함으로써 앞서 배양한 신체 미생물의 항생제에 대한 감수성 및 항생제의 항균력을 알아보는 것이 목적이다.여러 종류의 항생제(Ampicillin 100mg/ml, P/S 1mg/ml) paper disc, 은박지, 세균, 삼각봉, 70% EtOH, 알코올 램프, LB배지, pipette, tip, autoclave, 핀셋, 자를 준비물로 사용한다.
2.2. 준비물
여러 종류의 항생제(Ampicillin 100mg/ml, P/S 1mg/ml)이며, paper disc, 은박지, 세균, 삼각봉, 70% EtOH, 알코올 램프, LB배지, pipette, tip, autoclave, 핀셋, 자를 준비한다. 이는 항생제 disc를 제작하고 균의 도말을 하며 disc를 심기 위한 필수적인 재료들이다.
2.3. 실험 방법
2.3.1. 항생제 disc 만들기
paper disc에 항생제를 loading하는 과정은 다음과 같다.
우선 paper disc를 은박지로 싸서 autoclave로 멸균한다. 그리고 멸균된 은박지 위에 필요한 양의 멸균된 disc를 멸균한 핀셋으로 올려놓는다. 그 후 각 disc에 항생제 용액을 20ul씩 떨어뜨려 젖게 만든다. 이렇게 loading된 disc는 10~20분 정도 건조시킨다.
건조 과정이 필요한 이유는 항생제가 고르게 확산되어야 효과적으로 항균력을 나타낼 수 있기 때문이다. 만약 건조 과정 없이 바로 배지에 올리면 항생제가 불규칙적으로 확산될 수 있다. 따라서 항생제 disc를 사용하기 전에 반드시 건조 과정을 거치는 것이 중요하다.
2.3.2. 균의 도말
실험 전에 사용할 균을 LB broth에 접종한 후 37℃에서 24시간 키워 activation 시킨다. 이때 activation 시킨 균 200ul를 배지(labelled)에 접종한다. 실험 전에 물기 제거를 위하여 37℃ incubator에서 2~3시간 정도 둔다. 또한 70% EtOH와 알코올램프로 삼각봉을 멸균하고, 충분히 식힌 후 접종한 균을 골고루 도말한다. 이를 통해 오염을 막고 균을 배양할 수 있는 최적의 환경을 조성할 수 있다.
2.3.3. Disc 심기
멸균된 핀셋으로 아무것도 처리하지 않은 disc(control)와 항생제가 loading 된 disc를 집어 균이 도말된 plate 위에 살포시 올려놓는다. Disc를 심은 후 빠른 시간 내에 37°C incubator에서 배양한다. 24~48시간 배양 후, 자를 이용하여 clear zone (zone of inhibition)의 지름을 측정한다. 각 항생제 disc는 배지 가장자리에서 1.5cm정도 떨어지게 한 후 정해진 장소에 올려놓는다. 또한 paper를 심기 전에 배지의 뒷면에 어떤 위치에 어떠한 항생제 disc를 심을 것인지 표시해준다. Disc 간 간격은 2.4cm 이상 되게 하는 것이 좋다. 이러한 방식으로 항생제 감수성 검사를 진행하면, 항생제 농도에 따른 세균의 생장 억제 정도를 명확하게 확인할 수 있다.
2.4. 주의사항
각 항생제 disc는 배지 가장자리에서 1.5cm정도 떨어지게 한 후 정해진 장소에 ...
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