소개글
"일반생물학실험 플라스미드 DNA 추출"에 대한 내용입니다.
목차
1. 플라스미드 DNA 추출
1.1. 실험 목적
1.2. 실험 이론 및 원리
1.2.1. Plasmid DNA
1.2.2. Plasmid DNA 분리 정제
1.2.2.1. CsCl/EtBr Equilibrium Centrifugation
1.2.2.2. Boiling method
1.2.2.3. Alkaline lysis method
1.3. 실험 기구 및 시약
1.4. 실험 방법
1.5. 실험 결과 및 토의
1.5.1. 실험 고찰
2. 참고 문헌
본문내용
1. 플라스미드 DNA 추출
1.1. 실험 목적
Alkaline lysis (denaturation) method에 대해 알아보고 이 방법을 통해 플라스미드 DNA를 추출해보는 것이 이 실험의 목적이다""DNA Mini prep이란 말을 쓰는데 prep은 'prepartion'의 줄임말로 DNA를 소량으로 추출한다는 의미이다. plasmid를 추출하는 방법으로는 기본적으로 여러가지가 있지만 그 가운데 대표적인 방법으로 alkaline lysis (denaturation) method가 이용되고 있다. 세포내에 DNA는 일반적인 double-helix를 형태를 가지는 반면 plasmid는 동그란 모양인 supercoiled형태를 가짐으로써 pH의 변화에 따라서도 plasmid의 형태와 구조가 크게 변하지 않는다는 특징을 가지고 있다. plasmid는 주로 vector로 많이 사용되는데 이 vector란 원하는 유전자 단편을 숙주세포 안으로 안정하게 운반하는 vehicle 형태 즉 운반체의 역할을 하는 것을 말한다. 박테리아의 항생제에 대한 내성이 한 세포에서 다른 세포로 옮겨질 때 plasmid를 통해 이루어진다고 알려진 후 항생제 내성에 대한 유전자 뿐 아니라 항생제 합성이나 독 물질 합성, 질소고정 및 분해, 여러 효소들에 대한 유전자를 함께 가지고 있음이 밝혀지고 난 후 분자유전학연구에 많이 쓰이게 되었다. 이처럼 plasmid DNA는 분자생물학 실험에 매우 유용하게 활용되는 중요한 생명과학 도구이다""
1.2. 실험 이론 및 원리
1.2.1. Plasmid DNA
플라스미드 DNA는 세균과 같은 원핵생물의 세포 내 염색체와 별개로 독립적으로 존재하는 원형의 이중나선 DNA 분자이다. 일반적으로 플라스미드는 세균의 생장이나 생존에 필수적이지는 않지만, 세균에게 유익한 특성을 부여할 수 있다.
플라스미드는 염색체보다 작으며 자신만의 복제개시점을 갖고 있기 때문에 염색체와 독립적으로 복제할 수 있다. 또한 플라스미드가 갖고 있는 일부 유전자는 세균과 같은 숙주세포의 특성에 영향을 줄 수 있다. 예를 들어 P-플라스미드는 페니실린을 포함한 여러 항생제에 대한 내성을 갖게 하는 유전자를 가지고 있어, P-플라스미드를 갖고 있는 Pseudomonas라는 세균 또한...
참고 자료
알기 쉽고 재미있는 분자생물학 4판. n.p.: (주)라이프 사이언스. David P. Clark, Lonnie D. Russell. 2013.
Purves, Life The Science of Biology, 7th Edition, Freeman, 2007, p.312-313
Campbell, Biology, 8th Edition, Pearson, 2008, p. 399
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